隨著
多功能酶標(biāo)儀在國(guó)內(nèi)各高校實(shí)驗(yàn)室逐漸推廣開(kāi)來(lái),多功能酶標(biāo)儀品牌和型號(hào)也逐漸多了起來(lái),亂花漸欲迷人眼。各品牌都有各自的一個(gè)甚至多個(gè)系列產(chǎn)品線,特性各不相同,選購(gòu)時(shí)各種技術(shù)參數(shù)、技術(shù)指標(biāo)令人眼花繚亂,本文嘗試從用戶(hù)實(shí)際使用的角度,探討應(yīng)該如何看待花樣繁多的參數(shù)特性,希望能幫助大家找到真正合適自己的多功能酶標(biāo)儀。
光柵型濾光系統(tǒng)儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能酶標(biāo)儀的主流,多家廠家共同努力,已經(jīng)把光柵技術(shù)推到了歷史新高。在光柵的眾多技術(shù)參數(shù)之中,zui關(guān)鍵的無(wú)疑就是光柵的雜光率和波長(zhǎng)選擇的正確性了。
雜光率指得就是光源通過(guò)光柵后,得到的光線中,“不需要”的波長(zhǎng)的光占所標(biāo)稱(chēng)波長(zhǎng)的光的比例,表征了濾光的純度。由于光線干涉、衍射等的復(fù)雜性,無(wú)論使用濾光片還是光柵,雜光都是不可避免的。各種濾光技術(shù)的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地往掉。一般來(lái)說(shuō),濾光片型的雜光率在10-4——10-5之間,光柵型的可以做到10-6——10-7。由于此類(lèi)雜光是非特異的,而且會(huì)直接進(jìn)進(jìn)zui后的檢測(cè)器,所以有多少的雜光就會(huì)引進(jìn)多少的隨機(jī)誤差。在熒光等檢測(cè)過(guò)程中,由于檢測(cè)器存在放大效應(yīng),雜光率的干擾也會(huì)被指數(shù)級(jí)放大。因此,雜光率就是一個(gè)濾光系統(tǒng)的首要性能指標(biāo)。
光柵的另一個(gè)重要指標(biāo)就是波長(zhǎng)選擇的正確性。由于很多檢測(cè)是依靠于物質(zhì)在某個(gè)波長(zhǎng)的特征圖譜。就像DNA/RNA的OD260濃度測(cè)定,實(shí)際檢測(cè)波長(zhǎng)偏離260nm幾個(gè)nm以上的話,OD值與*濃度之間的數(shù)學(xué)關(guān)系就會(huì)發(fā)生改變。因此,一組性能優(yōu)良的光柵系統(tǒng),他的波長(zhǎng)選擇正確性應(yīng)該是在±0.5——1nm之間。波長(zhǎng)偏離過(guò)大有時(shí)就會(huì)影響到*結(jié)果的正確性。
這兩個(gè)可謂是光柵甚至濾光片濾光系統(tǒng)zui關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù),直接影響到的是得到數(shù)據(jù)是否是真正所要丈量的結(jié)果,是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的zui基本要求。
多功能酶標(biāo)儀的分類(lèi)方法眾多,但zui簡(jiǎn)單的莫過(guò)于用他們的濾光方式來(lái)作分界線。一般來(lái)說(shuō),可以分為濾光片型和光柵型兩大類(lèi)。一臺(tái)機(jī)器里面同時(shí)裝上了濾光片和光柵。但是濾片和光柵并不能同時(shí)完成同一個(gè)檢測(cè),還是想用光柵的時(shí)候用光柵,該用濾片的時(shí)候用濾片;還有一些實(shí)驗(yàn)非用其中一個(gè)不可,另一模塊實(shí)現(xiàn)不了的。所以這類(lèi)儀器本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起,并沒(méi)有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。
總體來(lái)說(shuō),濾片技術(shù)由于發(fā)展已久,配合二向色鏡(實(shí)在也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統(tǒng),可以實(shí)現(xiàn)大部分實(shí)驗(yàn)的需要。目前常規(guī)多功能酶標(biāo)儀中zui高的檢測(cè)靈敏度就是用濾光片型做出來(lái)的,比較適合常規(guī)實(shí)驗(yàn)。